miRNA尿素-PAGE上样液，6×

产品及特点 

本产品是6×的miRNA尿素-PAGE变性电泳上样液，含有RNase-free的去离子甲酰胺、RNase-free的EDTA和RNase-free的染料等。它具有下列特点：

1. 即开即用，不需要制备RNase-free的各种溶液。

2. 使用简单，电泳时，先将miRNA样品与本上样液1：5混合，70℃加热处理2-3分钟后，0℃冷却即可直接上样。

3. 染料分子小，不会干扰miRNA的染色。

4. 跟本公司的一 站式miRNA 尿素-PAGE电泳套装兼容。

5. 还可以用于miRNA的琼脂糖电泳。

RNA提取法：试剂中的主要成分为异硫氰酸胍和苯酚，其中异硫氰酸胍可裂解细胞，促使核蛋白体的解离，使RNA与蛋白质分离，并将RNA释放到溶液中。当加入氯时，它可抽提酸性的苯酚，而酸性苯酚可促使RNA进入水相， 离心后可形成水相层和有机层，这样RNA与仍留在有机相中的蛋白质和DNA分离开。水相层(无色)主要为RNA，有机层(黄色)主要为DNA和蛋白质。

实验步骤：

1、RNA的提取;

2、反转录合成cDNA;

3、PCR扩增;

4、产物的电泳和结果的测定。

RT-PCR是将RNA的反转录(RT)和cDNA的聚合酶链式扩增(PCR)相结合的技术。首先经反转录酶的作用从RNA合成 cDNA，再以cDNA为模板，扩增合成目的片段。RT-PCR可以一步法或两步法的形式进行。在两步法RT-PCR中，每一步都在zui条件下进行。

碱变性提取质粒DNA是基于染色体DNA与质粒DNA的变性与复性的差异而达到分离目的。在pH高达12.6的碱性条件下，染色体DNA的氢键断裂，双螺旋结构解开而变性。质粒DNA的大部分氢键也断裂，但超螺旋共价闭合环状的两条互补链不会完全分离，当以pH4.8的NaAc高盐缓冲液去调节其pH至中性时，变性的质粒DNA又恢复原来的构型，保存在溶液中，而染色体DNA不能复性而形成缠连的网状结构，通过离心，染色体DNA与不稳定的大分子RNA、蛋白质-SDS复合物等一起沉淀下来而被除去。

特别提示：本公司的所有产品仅用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！