动植物膜蛋白微量制备试剂盒 

Animal-Plant Membrane Protein Miniprep Kit

产品及特点  细胞膜蛋白质参与了很多重要的细胞活动，根据它们与膜结合的位置一般分为两种，一种是附着在细胞膜上，另一类是嵌入到细胞膜中间。附着型膜蛋白疏水性较弱，比较容易提取和纯化；而嵌入型膜蛋白疏水型很强，所以在水溶液里面很难溶解，非常难以提取和纯化。根据上述特点，经过精心优化的、开发出本产品，专门用于分离纯化这两种膜蛋白。

1. 两步法提取，先纯化含膜组分，再分离附着型膜蛋白和嵌合型膜蛋白。

2. 膜蛋白(附着型+嵌入型)产量高，对肝脏组织而言，其线粒体膜蛋白产率为10μg/mg左右，过氧化物酶体为1μg/mg左右，内质网为25-30μg/mg。

3. 所得的膜蛋白大部分具有生物活性，可用于活性研究。

4.可用动物、植物培养细胞和实体细胞为材料，也可用预先纯化的含膜组分或细胞器(如线粒体、叶绿体、内质网、过氧化物酶体)为材料(本试剂盒不含纯化细胞器的试剂)。

5. 本方法重复性好。

6. 本试剂盒足够50次微量提取，分A型和B型两种。A型用于附着型膜蛋白，B型用于嵌合型膜蛋白和附着型膜蛋白。

运输及保存 常温运输和和保存，有效期一年

使用方法 

1. 对培养细胞：收集1×107个培养细胞(动物

5. 4℃ 2500rpm离心20分钟，沉淀为细胞核，上清为胞浆和膜成分，留少量样品作为对照2(胞浆和膜成分)。

6. 将上清液用Beckman Optima 台式超速离心机100,000 g 4℃离心60分钟。也可以使用其他冷冻超速离心机，但离心力应该为100,000g，否则有可能得不到膜成分沉淀。

7.小心转移上清(胞浆部分)并留少量样品作为对照3(胞浆)。

8. 将沉淀(含膜组分)重悬于1mL 冰浴的溶液C中后，冰上静置30分钟，留少量样品作为对照4(膜成分)。本成分电泳前，需要先用自备的TCA沉淀(TCA 终浓度为10%)，再用冰冷的丙酮洗涤两次后再溶解在1×上样液中待用。对照1-3 号不需要这样的预处理。

9. 用Beckman Optima 台式超速离心机100,000g 4℃离心60分钟。也可以使用其他冷冻超速离心机，但离心力应该一致，否则有可能得不到沉淀。

10. 如果需要附着型膜蛋白，则取上清(含附着型膜蛋白)弃沉淀(含膜和其中的嵌合型膜蛋白)。上清可以放-20℃长期保存，如果需要电泳，需要先用自备的TCA沉淀(TCA 终浓度为10%)，再用冰冷的丙酮洗涤两次后再溶解在1×上样液中与对照1-4 号一起上样电泳。

11. 如果需要嵌合型膜蛋白，则取出上清(含附着型膜蛋白)并留少量样品作为附着型膜蛋白样品，然后再用1mL 冰浴的溶液C重悬沉淀，然后100,000g 4℃离心60分钟，去掉上清(上清含残留的附着型膜蛋白，可以留样作为洗涤后的附着型膜蛋白样品)。沉淀含膜和其中的嵌合型膜蛋白。如果需要测定膜蛋白的浓度，则将其溶解在自备的0.5 M NaOH溶液。

特别提示：本公司的所有产品仅用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！