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动植物总蛋白微量提取试剂盒 ZY60707

Animal-Plant Total Protein Miniprep Kit

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动植物总蛋白微量提取试剂盒

Animal-Plant Total Protein Miniprep Kit

产品及特点 本产品用于快速提取动植物总蛋白,用于SDS-PAGE凝胶电泳和Western印迹分析以及蛋白活性测定等。

1. 提取过程十分简便,匀浆离心即可,整个过程只需要十几分钟。

2. 采用独特的温和裂解成分,蛋白保持天然活性。

3.适用于各种动植物组织材料,包括新鲜或冰冻的材料。

4. 得到的提取物可以直接用于SDS-PAGE、2D电泳、Western印迹分析以及蛋白活性测定等下游实验。

5.一次可以处理100mg左右的样品,足够进行几十次SDS-PAGE mini胶电泳检测。本

运输及保存 常温运输,4℃保存,5×SDS-PAGE上样液短期4℃保存,长期可放-20℃保存,有效期一年。

使用方法 

使用前,最好请在溶液A中加入自备的1M DTT溶液50μL。


一:匀浆法

?注意:对致密的实体组织(如肌肉),最好用Polytron 式匀浆机匀浆处理。

1. 称取动物或植物组织样品100mg,剪刀剪成黄豆大小,转移到10-15mL的塑料离心管中。

2. 加入1ml溶液A,在冰上用Polytron 式匀浆机匀浆,直到没有肉眼可见的组织块。为了避免产热,可以分多次匀浆,其间放冰上让匀浆液冷却。

3. 将匀浆液全部转移到1.5mL的塑料离心管中。

4. 4℃ 12000 g离心10分钟,组织残渣碎片将形成沉淀。

5. 将上清液转移至一新的1.5mL塑料离心管中即得到蛋白溶液,可置于-70℃冰箱保存或立即使用。如果要测定蛋白浓度,请使用BCA方法,不要使用Bradford方法(如果要使用,也需要把样品稀释10倍后再测定,否则溶液A中的成分会影响浓度侧定)。如果要进行SDS-PAGE电泳,可取部分到离心管中,加入5×SDS-PAGE上样缓冲液(终浓度为1×),在沸水中处理5分钟后立即上样电泳。


二:直接研磨法

?注意:可以使用玻璃和陶瓷的研钵,也可以使用与微量离心管式的研磨杵(BTN80603)

1. 称取动物或植物组织样品100mg,剪刀剪成黄豆大小,转移到预冷的研钵或离心管中。

2. 加入1ml溶液A,用研磨杵研磨,直到没有肉眼可见的组织块。

3. 将匀浆液全部转移到1.5mL的塑料离心管中。

4. 4℃ 12000g离心10分钟,组织残渣碎片将形成沉淀。

5. 将上清液转移至一新的1.5mL塑料离心管中即得到蛋白溶液,可置于-70℃冰箱保存或立即使用。如果要测定蛋白浓度,请使用BCA方法,不要使用Bradford方法(如果要使用,也需要把样品稀释10倍后再测定,否则溶液A中的成分会影响浓度侧定)。如果要进行SDS-PAGE电泳,可取部分到离心管中,加入5×SDS-PAGE上样缓冲液(终浓度为1×),在沸水中处理5分钟后立即上样电泳。


三:液氮研磨法

?注意:最好使用玻璃和陶瓷的研钵

1. 取大约100mg动物或植物组织样品,转移到预冷的研钵中。

2. 加入少量液氮,用研磨杵研磨成粉。

3. 加入1ml溶液A溶解,然后将溶液全部转移到1.5mL的塑料离心管中。

4. 4℃ 12000 g离心10分钟,组织残渣碎片将形成沉淀。

5. 将上清液转移至一新的1.5mL塑料离心管中即得到蛋白溶液,可置于-70℃冰箱保存或立即使用。如果要测定蛋白浓度,请使用BCA方法,不要使用Bradford方法(如果要使用,也需要把样品稀释10倍后再测定,否则溶液A中的成分会影响浓度侧定)。如果要进行SDS-PAGE电泳,可取部分到离心管中,加入5× SDS-PAGE上样缓冲液(终浓度为1×),在沸水中处理5分钟后立即上样电泳。

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