INVSc1感受态细胞
英文名:INVSc1 Chemically Competent Cell
储存条件:-80°C
CAS:N/A
级别:N/A
分子式:N/A
分子量:N/A
纯度:N/A
产品储存:-80 ℃保存,一年有效。
产品组成:
基因型:
MATa his3Δ1 leu2 trp1-289 ura3-52/MATα his3Δ1 leu2 trp1-289 ura3-52
产品说明:
INVSc1菌株是专门用来做重组蛋白表达的宿主酵母,pYES2质粒与INVSc1酵母配套使用,激活pYES2质粒的GAL1启动子的转录进而启动下游重组蛋白的表达。INVSc1为合子型,可直接通过PEG/LiAc将pYES2质粒转化进入INVSc1细胞内。质粒pYES2的筛选标志为URA,可用SD-URA板进行筛选。INVSc1感受态细胞经特殊工艺制作,-80℃可保存六个月,pYES2质粒检测转化效率>104 cfu/μg DNA。
使用方法:
1.取100 µl冰上融化的INVSc1感受态细胞,依次加入预冷的目的质粒2-5 µg,Carrier DNA (95-100℃,5 min,快速冰浴,重复一次) 10 µl,PEG/LiAc 500 µl并吸打几次混匀,30℃水浴30 min (15 min时翻转6-8次混匀)。
2.将管放42℃水浴15 min (7.5 min时翻转6-8次混匀)。
3. 5000 rpm离心 40 s弃上清,ddH2O 400 µl 重悬,离心 30s弃上清。
4. ddH2O 50 µl重悬,涂质粒筛选用:SD-U medium板,29℃培养48-96 h。
注意事项:
1.感受态细胞最好在冰上融化。
2.转化高浓度的质粒可相应减少最终用于涂板的菌量。
3.INVSc1酵母菌株对高温敏感,最适生长温度为27-30℃;高于31℃,生长速度和转化效率呈指数下降。
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