植物总蛋白提取试剂盒（非变性，微量）

英文名：Plant Total Protein Extraction Kit

储存条件： -20℃

保存：-20℃保存，一年有效。

产品简介：

  本产品用于快速提取植物总蛋白，用于 SDS-PAGE 凝胶电泳和 Western 印迹分析以及蛋白活性测定等。采用独特的温和裂解成分，蛋白保持天然活性。得到的提取物可以直接用于 SDS-PAGE、2D 电泳、Western 印迹分析以及蛋白活性测定等下游实验。

使用方法：

使用前请取吸取50μL 的1M DTT溶液加入到植物总蛋白提取液中，未用完产品可-20℃ 长期保存。

液氮研磨：

1、 取大约 100 mg植物组织样品，剪碎转移到预冷的研钵中。加入少量液氮，用研磨杵研磨成粉。

2、 加入 1ml植物总蛋白提取液混匀，然后将混合液全部转移到 1.5 mL 的离心管中。  

3、 4℃ 12,000 rmp/min 离心 10 分钟，组织残渣碎片将形成沉淀。

4、 将上清液转移至一新的 1.5 mL 离心管中即得到蛋白溶液，可置于-80℃ 冰箱保存或立即使用。

匀浆： 

1、 称取植物组织样品 100 mg，剪刀剪成碎片，转移到预冷的15mL离心管中。

2、 加入 1ml 植物总蛋白提取液，在冰上用 Polytron 式匀浆机匀浆，直到没有肉眼可见的块状物。为了避免样品过热，可以分多次匀浆，其间放冰上让匀浆液冷却。

3、 将匀浆液全部转移到 1.5 mL 的离心管中。

4、 4℃ 12,000 rmp/min 离心 10 分钟，组织残渣碎片将形成沉淀。

5、 将上清液转移至一新的 1.5 mL 离心管中即得到蛋白溶液，可置于-80℃ 冰箱保存或立即使用。

注意事项： 

1、 如果急用或者暂时没有液氮或者匀浆机，也可以正常研磨：称取植物组织样品 100 mg，剪刀剪成碎片，转移到预冷的研钵或离心管中； 加入 1ml 植物总蛋白提取液，用研磨杵研磨，直到没有肉眼可见的块状物。后续和液氮研磨步骤一致。

2、 植物组织中存在有大量的多酚、多糖、色素、次生代谢产物，如果需要除去植物蛋白样品中残存的色素等杂质，可以在最后得到的上清液中加入 5 倍体积的冷丙酮或冷甲醇，混匀后-20℃放置 1 小时或过夜，然后 4℃ 12,000 rmp/min 离心 10 min，弃上清后室温风干，然后将样品溶于自备的后续实验缓冲液中即可。经过此纯化处理后，部分蛋白质可能会发生变性， 不能再用于活性检测。

3、  本产品所含有较高浓度的去垢剂会对 Bradford 蛋白浓度测定有较大影响，因此只能使用 BCA 法测定蛋白浓度。

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