蛋白凝胶银染试剂盒

英文名：Protein silver stain plus kit

储存条件：RT

储存条件：RT，保质期 1 年。

产品说明：

  本试剂盒采用高灵敏度的银染染料，可应用于变性胶及非变性胶的蛋白染色，具有目的条带清晰、背景低、操作时间可灵活控制的优点。另外，本试剂盒增加了一步短时敏化作用步骤，可明显降低背景及提升目的条带的亮度。

使用说明：（需自备无水乙醇、冰醋酸）

  以下操作步骤中各溶液的用量以大小为8.5×5.5 cm、厚度为1.0 mm的凝胶为例，以凝胶全部浸没到溶液为准，置于摇床上操作，一般用量25 ml。对于大型凝胶，各溶液的配制量需按凝胶体积的比例放大。

注：实验前准备50 ml固定液（冰醋酸：乙醇：超纯水=1:4:6）、50 ml洗脱液（10%乙醇）和50 ml终止液（5%的冰醋酸）。

1．水洗：电泳完成后，用超纯水洗胶2次，每次洗涤5分钟。

2．固定：用25 ml固定液固定凝胶2次，每次固定15分钟。

3．洗脱：用洗脱液洗胶2次，每次洗涤5分钟。

4．水洗：用超纯水洗胶2次，每次洗涤5分钟。

5．增敏：将上一步洗好的凝胶置于增敏液中，室温下准确孵育1分钟后用超纯水洗胶3次，每次洗涤20秒。增敏液的配制：取A液125 μl加入到25 ml超纯水中，混匀。

6．银染：弃去超纯水，将凝胶置于银染工作液中孵育30分钟。银染液的配制：取B液250 μl、D液 50 µl 加超纯水至25 ml，混匀。

7．水洗：用超纯水快速洗胶2次，每次洗涤准确控制为20秒。

8．显影：立即将洗好的凝胶浸没在显影液中，室温孵育2-3分钟，直至蛋白条带显示清晰。显影液的配制：取C液5 ml、D液30 µl加超纯水至25 ml，混匀。

注意：显影30秒内，蛋白条带开始显现，继续显影至2-3分钟。若蛋白条带显色较浅，可适当延长显影时间至5分钟或以上。

9．终止：弃去显影液，将凝胶浸泡在终止液中反应10分钟。

注意事项：

1．提前准备固定液、洗脱液和终止液；实验前配制增敏液、银染液和显影液，现配现用。

2．操作时请使用超纯水和洁净的玻璃或塑料器皿，须戴一次性手套进行操作。

3．整个银染过程需在摇床上进行，摇床转速约60 rpm左右。

4．需自备乙醇、冰醋酸和超纯水。

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