高分子量非变性电泳蛋白Marker(66-669 kD,5条带)
英文名:High MW non-denaturing protein Marker
储存条件:-20°C
本产品是5种高纯蛋白质干粉混合物,总蛋白含量为250μg。具体蛋白含量如下:
蛋白名称 | 分子量(kD) | 蛋白来源 | 蛋白含量(μg) |
Thyroglobulin | 669 | porcine thyroid | 76 |
Ferritin | 440 | equine spleen | 50 |
Catalase | 232 | bovine liver | 36 |
Lactate dehydrogenase | 140 | bovine heart | 48 |
Albumin | 66 | bovine serum | 40 |
操作说明:
1. 取100μl非变性蛋白上样缓冲液(1×)加入到蛋白干粉混合物中,彻底混匀融化后,-20℃贮存。
2. 常温融化后,彻底混匀,上样电泳。
注:上样量根据胶的厚度和梳子的宽度确定。一般说来,0.75mm×5mm(厚度×宽度)的加样孔上样5 μl,其他规格梳子请适当调整上样量。
3. 电泳结束后,染色,观察结果。
注:使用银染时,由于灵敏度高于考马斯亮蓝染色方法,可以适当降低Marker上样量,一般稀释50倍。
注意:
1. 本蛋白Marker不适用于变性蛋白电泳(SDS-PAGE),因为在SDS存在下,含有多个亚单位的蛋白会不同程度解聚。
2. 在非变性条件下,蛋白的迁移与蛋白的电荷、蛋白形状以及蛋白分子量都有关。因此,在一种凝胶浓度下使用本Marker不能精确估计出目的蛋白的分子量。非变性电泳中,蛋白分子量的确定应该是在不同凝胶浓度下,确定出蛋白的Rf值,绘制出凝胶浓度对Rf的曲线从而判定蛋白的分子量。
7.5% Laemmli Native gel
150V 70min DM2003 5μL
6% Laemmli Native PAGE
1×Tris-Glycine buffer 150V 70min DM2003 5μL
左1:高分子量非变性电泳蛋白质Marker(66-669 kD) 5 μl
左2-5:待检样品 各5μl
电泳条件:
5-12% 聚丙烯酰胺梯度胶 厚1mm
Tris-甘氨酸不连续系统
150V 稳压电泳
考马斯亮蓝G250染色
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