热稳定无机焦磷酸酶
描述:热稳定无机焦磷酸酶纯化自重组 E. coli 菌株,携带从极度耐热的 Thermococus litoralis 中克隆的无机焦磷酸酶基因。该焦磷酸酶催化无机焦磷酸盐水解生成正磷酸盐。P207–4 + H20 →2HP04–2。该酶在 100°C 加热 4h 仍然具有100%活性,因此可用于 PCR 反应,解除生成的无机焦磷酸盐对 PCR 的抑制,增强 DNA 的复制。
储存:-20℃可保存 3 年。
活性定义:1单位指标准反应条件下:0.5ml反应体系,50 mMTricine pH8.5,1 mM MgCl2 和 0.32 mM PPi,75°C 反应 10钟,每分钟催化无机焦磷酸盐生成 1μmol 磷酸盐的酶量。
使用注意事项:(1) 该酶在多种反应 Buffer 中均具有活性,通常该酶在tHDA 扩增、PCR、测序反应等实验中,可直接接入即可。(2) 该酶的用量在不同的实验中需要优化,通常在 5~50U/ml 浓度调整。(3) 该酶不可以热失活
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