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SHuffle T7 E. coli Chemically Competent Cell(SHuffleT7大肠杆菌感受态细胞) ZY62030EC

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SHuffle T7 E. coli Chemically Competent Cell  


货号:ZY62030EC 


规格:100μl*10


产品规格 

SHuffle T7 E. coli Competent Cell 100μl /支 

pUC19 (control vector, 10pg/μl) 10μl 

保存条件(保质期): -80℃(6 个月) 


基因型 

F´ lac, pro, lacIq / Δ(ara-leu)7697 araD13fhuA2 lacZ::T7 gene1 Δ(phoA)Pvull phoR ahpC* galE(or U) galKλatt::pNEB3-r1-cDsbC (Spec R, laclq) ΔtrxBrpsL150(StrR)Δgor Δ(malF)3 


产品说明 

SHuffle T7 E. coli 菌株是 K12 的衍生菌株。该菌株的染色体中整合了一个拷贝的二硫键异构酶 DsbC 基因 ,可以 促进含有二硫键蛋白的正确折叠;此外 DsbC 还是一个分子伴侣,可以帮助不含二硫键蛋白正确折叠,形成正确构 象,同时该菌株可降低目的基因的本底表达,适合于毒性基因的原核表达。SHuffle T7 E. coli 菌株染色体中整合了 一个拷贝的 T7 RNA 聚合酶基因,可以表达噬菌体 T7 RNA 聚合酶,适合于 T7 启动子诱导的蛋白表达;该菌株还 可以表达大肠杆菌 RNA 聚合酶,所以可用于 pET 系列,pGEX,pMAL 等质粒的蛋白表达。SHuffle T7 E. coli 菌 株具有抗 T1 噬菌体感染的特点,具有链霉素,壮观霉素抗性。SHuffle T7 E. coli 感受态细胞由特殊工艺制作, pUC19 质粒检测转化效率达 10 8 cfu/μg DNA。 


操作方法 

1. SHuffle T7 E. coli 感受态细胞从-80℃拿出,迅速插入冰中,5 分钟后待菌块融化,加入目的质粒并用手拨打 EP 管底轻轻混匀(避免用枪吸打),冰中静置 25 分钟。 

2. 42℃水浴热激 45 秒,迅速放回冰中并静置 2 分钟,晃动会降低转化效率。 

3. 向离心管中加入 700 μl 不含抗生素的 LB 无菌培养液,37℃,200 rpm 复苏 60 分钟。 

4. 5000 rpm 离心一分钟收菌,留取 50 μl 左右上清轻轻吹打重悬菌块并涂布到含相应抗生素的 LB 培养基上。 

5. 将平板倒置放于 37℃培养箱过夜培养。


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