Super ECL Plus（超敏化学发光检测试剂盒） 

产品货号：S6009M

产品规格：100 mL

产品内容：

储存条件：4℃密封避光保存，短期可放置于室温。有效期见外包装。 

产品介绍：

Super ECL Plus 免疫印迹底物是增强型化学发光（ECL） 过氧化物酶的底物，可帮助用户在免疫印迹分析过程中实现 低表达或高价值蛋白的检测。 Super ECL Plus 底物可为使用辣根过氧化物酶（HRP）偶 联物的免疫印迹实验提供明亮的信号，对低表达或高价值蛋 白检测灵敏度很高。该 ECL 底物能够兼容各种膜、封闭液 和宽范围抗体稀释液，以出色性能、通用性和高性价比，满 足用户的免疫印迹应用需求。 Super ECL Plus（超敏）特点： 1. 具有极高灵敏度：检测硝化纤维素膜或 PVDF 膜上低表 达或高价值的蛋白条带； 2. 长信号持续时间：条件优化的情况下，经底物孵育的印 迹条带能够持续输出 6 至 8 h 的可检测光信号； 3. 价格经济：配方经过优化，适用于浓度极低的抗体检测。 • 0.2-1 μg/mL 一抗（或 1 mg/mL 的稀释 1:1,000-1:5,000） • 10-50 ng/mL 二抗（或 1 mg/mL 的稀释 1:20,000-1:100,000）

使用方法：

1. 执行常规 SDS-PAGE 电泳、转膜和 Western Blot 步骤，1.0-0.2 μg/mL 一抗室温孵育 1 h 或 4℃过夜，洗膜后，10-50 ng/mL 二抗孵育 30-60 min。 2. Western Blot 最后一次洗膜时，新鲜配制发光工作液：分 别取等体积的溶液 A 和 B，混匀。 注：建议立即使用工作液，室温放置数小时后仍可使用但灵 敏度略有降低。 3. 成像仪检测：用镊子取出 PVDF 膜置于成像仪检测板上， 含蛋白面朝上，沥干洗液但勿使膜完全干燥。将发光工作液 （0.125 mL 发光工作液/cm2 膜）滴加在 PVDF 膜上，使发 光液完全覆盖 PVDF 膜，室温孵育 3-5 min，参考仪器说明 书进行检测。 4. 压片检测：用镊子取出 PVDF 膜置于保鲜膜上，含蛋白 面朝上，沥干洗液但勿使膜完全干燥。将发光工作液（0.125 mL 发光工作液/cm2膜）滴加在 PVDF 膜上，使发光液完全 覆盖 PVDF 膜，室温孵育 3-5 min，弃发光工作液，用保鲜 膜包好，将膜固定于片夹内，含蛋白面向上。暗室内压片 1 min，立即显影，根据结果再调整压片时间。或分别压片 0.5、 1、3、5 min，然后一起显影观察结果。

注意事项：

1. 发光液曝露于强光下时间过久灵敏度可能有降低，操作 时注意避光。戴手套可以避免在膜上留下手印。 2. 长时间曝光会加深背景；蛋白过量，会使条带强弱变化失去线性关系；曝光不足，则条带模糊或较浅。 3. 如果曝光后条带不佳，可用洗膜缓冲液洗膜，重新孵育 二抗，然后重新用 ECL 曝光。 4. 使用肉眼可见的预染色蛋白 Marker 和荧光-放射自显影曝光标签可精确确定胶片上条带的位置和大小。 5. NaN3 会抑制 HRP 活性，回收二抗应避免使用 NaN3，如 必需使用勿超过 0.01%。

常见问题：